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生化試劑常見(jiàn)問(wèn)題的幾點(diǎn)解決辦法
  • 更新日期:2024-06-11      瀏覽次數(shù):184
    • 1、樣品信息

      樣品的溶血、脂血、黃疸等會(huì)對(duì)測(cè)定成果發(fā)生非化學(xué)反應(yīng)的干擾。因此,應(yīng)根據(jù)溶血、脂濁、黃疸的光譜吸收特性,采用雙波長(zhǎng)或多波長(zhǎng)的檢測(cè)形式,并在成果核算中扣除因溶血、脂血、黃疸引起的影響,減少干擾程度。

      2、試劑空白

      試劑空白吸光度是反映試劑質(zhì)量的目標(biāo)。每種試劑都有必定的空白吸光度規(guī)模,試劑空白吸光度的改變往往提示該試劑的變質(zhì);有些試劑久置后變渾濁。這些狀況均可使空白吸光度升高。往往需要加大用量,才使“表觀"吸光度上升,將就過(guò)試劑空白核對(duì)的“關(guān)",其成果為如下?tīng)顩r:

      ①線性規(guī)模變窄 現(xiàn)象:高值測(cè)不高。原因:生產(chǎn)試劑時(shí)有效成分投料量缺乏;試劑成份穩(wěn)定性較差。

      ② 靈敏度變低現(xiàn)象:酶促反應(yīng)速度曲線斜率下降,測(cè)定成果有嚴(yán)峻系統(tǒng)誤差。原因:試劑底物濃度缺乏。

      ③低值偏高 現(xiàn)象:試劑空白的改變曲線(吸光度VS時(shí)刻)顯著動(dòng)搖。原因:試劑自身不穩(wěn)定,自行分解;東西酶純度不夠,雜酶含量超限,導(dǎo)致干擾效果。

      3、測(cè)定規(guī)模

      每種待測(cè)物都有一個(gè)可測(cè)定的濃度或活性規(guī)模,樣品成果若超越此規(guī)模,分析儀將顯示成果超越規(guī)模的提示。表明試劑現(xiàn)已變質(zhì),應(yīng)更換合格試劑。

      4、底物耗盡
      使用連續(xù)監(jiān)測(cè)法、兩點(diǎn)法測(cè)定酶活性時(shí),若酶活性十分高,底物接近被耗盡,吸光度上升或下降會(huì)超越某一吸光度改變規(guī)模,監(jiān)測(cè)期的吸光度將偏離線性,使測(cè)定成果不可靠。

      5、酶的預(yù)活化

      測(cè)定血清中的某些酶,如CK,離體(采血)后很簡(jiǎn)單失活。只有通過(guò)適當(dāng)?shù)倪€原效果才能重新激活。在AST,ALT采用IFCC推薦辦法測(cè)定時(shí)需要磷酸吡哆醛預(yù)活化。需要強(qiáng)調(diào):含有活化劑的生化試劑,其測(cè)定酶活性的成果要高些。

      6、校準(zhǔn)與成果溯源性

      酶的校對(duì):要滿足在同一辦法學(xué)、同一測(cè)定條件、與理論核算的FACTOR值差異不大,沒(méi)有發(fā)現(xiàn)有顯著影響因素,方可進(jìn)行校對(duì)。

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